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液相色譜儀常用檢查器的品種
發(fā)布時(shí)間: 2016-03-22  點(diǎn)擊次數(shù): 1241次
液相色譜儀常用檢查器的品種
 
        檢查器的作用是將柱流出物中樣品組成和含量的改變轉(zhuǎn)化為可供檢查的信號(hào),常用檢查器有紫外吸收、熒光、示差折光、化學(xué)發(fā)光等。  
1.紫外可見(jiàn)吸收檢查器(ultraviolet-visible detector,UVD) 
    紫外可見(jiàn)吸收檢查器(UVD)是HPLC中運(yùn)用zui廣泛的檢查器之一,簡(jiǎn)直一切的液相色譜儀都配有這種檢查器。其特點(diǎn)是靈敏度較高,線性規(guī)模寬,噪聲低,適用于梯度洗脫,對(duì)強(qiáng)吸收物質(zhì)檢查限可達(dá)1ng,檢查后不損壞樣品,可用于制備,并能與任何檢查器串聯(lián)運(yùn)用。紫外可見(jiàn)檢查器的作業(yè)原理與構(gòu)造同通常分光光度計(jì)類(lèi)似,實(shí)際上即是裝有活動(dòng)地的紫外可見(jiàn)光度計(jì)。 

      (1)紫外吸收檢查器  
     紫外吸收檢查器常用氘燈作光源,氘燈則發(fā)射出紫外-可見(jiàn)區(qū)規(guī)模的接連波長(zhǎng),并裝置一個(gè)光柵型單色器,其波長(zhǎng)挑選規(guī)模寬(190nm~800nm)。它有兩個(gè)流轉(zhuǎn)池,一個(gè)作參比,一個(gè)作丈量用,光源宣布的紫外光照射到流轉(zhuǎn)池上,若兩流轉(zhuǎn)池都經(jīng)過(guò)純的均勻溶劑,則它們?cè)谧贤獠ㄩL(zhǎng)下簡(jiǎn)直無(wú)吸收,光電管上接受到的輻射強(qiáng)度持平,無(wú)信號(hào)輸出。當(dāng)組分進(jìn)入丈量池時(shí),吸收必定的紫外光,使兩光電管接受到的輻射強(qiáng)度不等,這時(shí)有信號(hào)輸出,輸出信號(hào)巨細(xì)與組分濃度有關(guān)。 
約束:活動(dòng)相的挑選受到必定約束,即具有必定紫外吸收的溶劑不能做活動(dòng)相,每種溶劑都有截止波長(zhǎng),當(dāng)小于該截止波長(zhǎng)的紫外光經(jīng)過(guò)溶劑時(shí),溶劑的透光率降至10%以下,因此,紫外吸收檢查器的作業(yè)波長(zhǎng)不能小于溶劑的截止波長(zhǎng)。 
      (2)光電二極管陣列檢查器(photodiode array detector, PDAD) 
    也稱疾速掃描紫外可見(jiàn)分光檢查器,是一種新式的光吸收式檢查器。它選用光電二極管陣列作為檢查元件,構(gòu)成多通道并行作業(yè),一起檢查由光柵分光,再入射到陣列式接收器上的全部波長(zhǎng)的光信號(hào),然后對(duì)二極管陣列疾速掃描收集數(shù)據(jù),得到吸收值(A)是保存時(shí)刻(tR)和波長(zhǎng)(l)函數(shù)的三維色譜光譜圖。由此可及時(shí)調(diào)查與每一組分的色譜圖相應(yīng)的光譜數(shù)據(jù),然后敏捷決議具有*挑選性和靈敏度的波長(zhǎng)。 
    單光束二極管陣列檢查器,光源宣布的光先經(jīng)過(guò)檢查池,透射光由全息光柵色散成多色光,射到陣列元件上,使一切波長(zhǎng)的光在接收器上一起被檢查。陣列式接收器上的光信號(hào)用電子學(xué)的辦法疾速掃描獲取出來(lái),每幅圖象僅需求10ms,遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)色譜流出峰的速度,因此可隨峰掃描。 

2.熒光檢查器(fluorescence detector, FD) 
    熒光檢查器是一種高靈敏度、有挑選性的檢查器,可檢查能發(fā)生熒光的化合物。某些不發(fā)熒光的物質(zhì)可經(jīng)過(guò)化學(xué)衍生化生成熒光衍生物,再進(jìn)行熒光檢查。其zui小檢查濃度可達(dá)0.1ng/ml,適用于痕量剖析;通常情況下熒光檢查器的靈敏度比紫外檢查器約高2個(gè)數(shù)量級(jí),但其線性規(guī)模不如紫外檢查器寬?! ∵@些年,選用激光作為熒光檢查器的光源而發(fā)生的激光誘導(dǎo)熒光檢查器極大地增強(qiáng)了熒光檢查的信噪比,因此具有很高的靈敏度,在痕量和超痕量剖析中得到廣泛運(yùn)用。 

3. 示差折光檢查器(differential refractive Index detector, RID) 
    示差折光檢查器是一種濃度型通用檢查器,對(duì)一切溶質(zhì)都有響應(yīng),某些不能用挑選性檢查器檢查的組分,如高分子化合物、糖類(lèi)、脂肪烷烴等,可用示差檢查器檢查。示差檢查器是根據(jù)接連測(cè)定樣品流路和參比流路之間折射率的改變來(lái)測(cè)定樣品含量的。光從一種介質(zhì)進(jìn)入另一種介質(zhì)時(shí),因?yàn)閮煞N物質(zhì)的折射率不一樣就會(huì)發(fā)生折射。只需樣品組分與活動(dòng)相的折光指數(shù)不一樣,就可被檢查,二者相差愈大,靈敏度愈高,在必定濃度規(guī)模內(nèi)檢查器的輸出與溶質(zhì)濃度成正比。 

4. 電化學(xué)檢查器(elec)chemical detector, ED) 
    電化學(xué)檢查器主要有安培、極譜、庫(kù)侖、電位、電導(dǎo)等檢查器,屬挑選性檢查器,可檢查具有電活性的化合物。目前它已在各種無(wú)機(jī)和有機(jī)陰陽(yáng)離子、生物安排和體液的代謝物、食物添加劑、環(huán)境污染物、生化制品、農(nóng)藥及醫(yī)藥等的測(cè)定中獲得了廣泛的運(yùn)用。其間,電導(dǎo)檢查器在離子色譜中運(yùn)用zui多。 
      電化學(xué)檢查器的長(zhǎng)處是:  
       ①靈敏度高,zui小檢查量~般為ng級(jí),有目可達(dá)pg級(jí); 
      ②挑選性好,可測(cè)定很多非電活性物質(zhì)中極痕量的電活性物質(zhì); 
       ③線性規(guī)模寬,通常為4~5個(gè)數(shù)量級(jí); 
      ④設(shè)備簡(jiǎn)略,本錢(qián)較低; 
        ⑤易于主動(dòng)操作。 

5. 化學(xué)發(fā)光檢查器(c。iluminescence detector, CD) 
    化學(xué)發(fā)光檢查器是這些年發(fā)展起來(lái)的一種疾速、靈敏的新式檢查器,因其設(shè)備簡(jiǎn)略、價(jià)廉、線性規(guī)模寬等長(zhǎng)處。其原理是根據(jù)某些物質(zhì)在常溫下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),生成處于激起態(tài)勢(shì)反應(yīng)中間體或反應(yīng)產(chǎn)品,當(dāng)它們從激起態(tài)回來(lái)基態(tài)時(shí),就發(fā)射出光子。因?yàn)槲镔|(zhì)激起態(tài)的能量是來(lái)自化學(xué)反應(yīng),故叫作化學(xué)發(fā)光。當(dāng)別離組分從色譜柱中洗脫出來(lái)后,立即與恰當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)發(fā)光試劑混合,引起化學(xué)反應(yīng),致使發(fā)光物質(zhì)發(fā)生輻射,其光強(qiáng)度與該物質(zhì)的濃度成正比。 
    這種檢查器不需求光源,也不需求雜亂的光學(xué)系統(tǒng),只需有恒流泵,將化學(xué)發(fā)光試劑以必定的流速泵入混合器中,使之與柱流出物敏捷而又均勻地混合發(fā)生化學(xué)發(fā)光,經(jīng)過(guò)光電倍增管將光信號(hào)成為電信號(hào),就可進(jìn)行檢查。這種檢查器的zui小檢出量可達(dá)10-12g。
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